菜花中DNA的提取一.实验原理2.核酸提取的步骤1）破碎细胞（材料不同，方法不同）匀浆器，捣碎器，溶菌酶消化，碱裂解等。2）除杂质，提DNA杂质：蛋白，多糖，脂类，RNA，DNaseA.DNase的抑制DNase需Mg2+,Ca2+激活，所以提取时加0.01MEDTA或EDTA钠盐。（螯合金属离子）加去垢剂或变性剂（SDS），可使DNase变性失活B.除RNA酶法：加RNase调节pH：RNA能在室温条件下被稀碱水解成核甘酸而DNA对碱较稳定（核酸的理化性质），所以提DNA一般要在偏碱的环境中提取，提RNA要在偏酸的环境中稳定。调节盐浓度(盐的分步沉淀)：在浓NaCl（1－2M）溶液中，DNA溶解度大，RNA溶解度小；在稀NaCl（0.14M）中，DNA溶解度小，RNA溶解度大，因此可利用不同浓度的NaCl溶液将DNA和RNA从样品中分开。C.除蛋白加去垢剂或变性剂（SDS，十二烷基硫酸锂LDS，十二烷基肌酸钠，脱氧胆酸钠）使蛋白变性，与DNA分开；用有机溶剂沉淀，除去蛋白常用的有机溶剂：苯酚，氯仿，异丙醇，醚，8－羟喹咛，间甲酚等本次实验所用：氯仿：异戊醇＝24：1氯仿：使有机相和水相易分层，增加核酸得率，同时可除去脂类。异戊醇：可减少泡沫，也能促使有机相，水相分离。D.除糖，脂类对于含糖量高，含脂高的样品需要做二.利用盐不同浓度提取DNA3）实验器材三.实验步骤3.向上述沉淀物加入0.14mol/LNaCl-0.15mol/LEDTA溶液2ml/管，25％SDS溶液0.25ml/管,搅拌至混匀。置60℃水浴保温10min，取出冷至室温。此步操作系使核酸与蛋白质分离。四.实验结果分析讨论五.琼脂糖凝胶法检测DNA