设计作品名称川牛膝的质量检测方案设计一、前言川牛膝为苋科植物川牛膝的干燥根，别称“白牛膝”、“拐牛膝”、“肉牛膝”。本品呈近圆柱形，微扭曲，上端略粗，下端略细或具少数分枝。长30-60厘米，直径0.5-3厘米。表面黄棕色或灰褐色，具纵皱纹，支根痕和多数横向突起的皮孔。川牛膝主要分布于四川、云南、贵州等地，于秋、冬二季采挖。川牛膝味甘，微苦，性平，归肝，肾经。具有活血调经，还可以散瘀，川牛膝性善下行，可以滋阴养肾，通利关节，利尿通淋，对川牛膝的性状、鉴别、水分含量、总灰、浸出物和川牛膝中杯苋甾酮的含量进行测定，既可以检测它的质量，又有助于更好的应用研发这个药材。二、设计依据《中华人民共和国药典》(2020版)将川牛膝中杯苋甾酮作为含量检测指标，杯苋甾酮的性状为白色针状结晶。根据《中国药典》和实际工作的相关需求，制定川牛膝的质量检测方案，从性状、鉴别、检查、含量测定等这几个方面对川牛膝进行检测，根据实验结果，达到控制质量的目的。三、设计方案（一）材料及仪器1.药材与试剂川牛膝药材，杯苋甾酮对照品，甲醇（色谱醇），纯化水，甲醇2.仪器显微镜、多功能粉碎机、扁形称量瓶、电热鼓风干燥箱、干燥器、万分之一电子天平、十万分之一电子天平、瓷坩埚、电加热炉、具塞锥形瓶、振摇机、水浴锅、冷凝管，蒸发皿、胖度吸管、刻度吸管、超声波清洗机、赛默飞高效液相色谱仪(U3000)、马弗炉。（二）具体检测方案1.性状通过眼看、手摸、鼻闻、口尝等手段对药材进行鉴别，本品应呈近圆柱形，微扭曲，向下略细或有少数分枝，长30～60cm，直径0.5～3cm。表面黄棕色或灰褐色，具纵皱纹、支根痕和多数横长的皮孔样突起。质韧，不易折断，断面浅黄色或棕黄色，维管束点状，排列成数轮同心环。气微，味甜。2.鉴别（1）显微鉴别显微鉴别粉末样品制备：遵循随机取样原则，取适量川牛膝药材饮片打粉，粉末混合均匀过5号筛，取适量粉末在载玻片上，进行透化操作（滴两滴水合氯醛，夹子夹着，放在酒精灯上加热几秒，至水合氯醛蒸干），重复2-3次，待载玻片冷却后，盖上盖玻片，然后观察。显微鉴别操作：先在4倍镜下找到需观察目标，移到视野中央，再调节10倍镜，仔细观察找一些相似轮廓，移到视野中央，再用四十倍镜放大并拍照。在薄壁细胞中找草酸钙砂晶或方晶，再找导管，具缘纹孔导管直径10—80μm，纹孔圆形或横向延长呈长圆形，互列，排列紧密，有的导管分子末端呈梭形。纤维长条形，弯曲，末端渐尖，直径8～25μm，壁厚3～5μm，纹孔呈单斜纹孔或人字形，也可见具缘纹孔，纹孔口交叉成十字形，孔沟明显，疏密不一。显微横切面鉴别：先把川牛膝软化在水中浸软，把切完的川牛膝放在培养皿中，越薄越好，可以加点水在培养皿中，这样制片的时候更好把它平铺在载玻片上，铺在载玻片上之后，滴加水合氯醛，在酒精灯上加热，直至边缘冒起小气泡就停止加热，继续滴加水合氯醛加热，以不烧干为度，直至完全透化。加热的温度不能太高了，防止水合氯醛沸腾而烫伤，等片子冷却放在显微镜下观察可以看见木栓细胞数列，栓内层窄，中柱大，三生维管束外韧型，断断续续排列成4～11轮，内侧维管束的束内形成层可见；木质部导管多单个，常径向排列，木化；木纤维较发达，有的切向延伸或断续连接成环。中央次生构造维管系统常分成2～9股，有的根中心可见导管稀疏分布。薄壁细胞含草酸钙砂晶、方晶。注意事项：①打粉机用完后要洗干净才能去打下一个样。②载玻片和盖玻片要保持干净，新的片子要用洗液或者肥皂水煮半个小时拿出来，先用流水冲洗再用蒸馏水冲洗一到两次，再放到70%-90%乙醇中泡着，备用。③可以借助偏光装置去找。（2）薄层色谱鉴别供试品溶液制备：取川牛膝粉末2g，加甲醇50ml，加热回流1小时，过滤，滤液浓缩至约1ml，加于中性氧化铝柱（100～200目，2g，内径为1cm）上，用甲醇-乙酸乙酯（1∶1）40ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。对照药材溶液制备：另取川牛膝对照药材2g，同法制成对照药材溶液。甲醇对照品溶液制备：取杯苋甾酮对照品，加甲醇制成每的溶液，作为对照品溶液。0.5mg1ml操作方法：吸取川牛膝样品溶液5～10μl、对照药材溶液和对照品溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇（10∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，在通风橱里面喷10%硫酸乙醇溶液，105℃加热到斑点显色清晰，紫外光灯（365nm）下检视。结果判断：川牛膝样品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，应显相同颜色的荧光斑点。注意事项：①自制和市售薄层板都要进行活化，活化后要放到干燥器里面保