乳酸菌发酵剂冻干保护剂筛选及应用的研究（完整版）实用资料(可以直接使用，可编辑完整版实用资料，欢迎下载）HYPERLINK"s://wkretype.bdimg/retype/zoom/3d474beb551810a6f524864f?pn=1&x=0&y=0&raww=200&rawh=118&o=png_6_0_0_45_1017_37_22_718.5_1057.5&type=pic&aimh=118&md5sum=a9735f1da195cedefcebf23e70ce6a52&sign=7301bd8f83&zoom=&png=0-14690&jpg=0-6605"\t"_blank"第29卷第4期1998年12月东北农业大学学报JournalofNortheastAgriculturalUniversity29(4):371～379December1998乳酸菌发酵剂冻干保护剂筛选及应用的研究()、、山梨醇、甘油、侧金盏花醇等13种材料对乳酸菌的冻干,海藻糖,侧金盏花醇为最佳保护剂,其次为蔗糖、麦芽糊精、山梨醇、谷氨酸钠、脱脂奶粉,在以水和增菌液为基质中冻干保护效果显著,对乳球菌的保护效果优于乳杆菌。冻干菌物菌落总数与菌体产酸力有一定关系,但与乳糖酶关系不明确,冻干后的菌体表面呈脑回样皱褶,但形态变化不大。并设计了最佳冻干保护剂配方。关键词乳酸菌,冻干保护剂,筛选中图分类号S939.117的冻干保护剂。0前言1材料与方法冷冻保藏与冻干技术是生物学的一个重要应用技术,近年来这一技术因“功能性(FunctionFood)的快速发展而被用食品”于食品生产中,此外,商品化乳酸菌发酵剂的制备也常用此技术。然而,欲获得理想的冷冻及冻干效果,除工艺外,主要是筛选与使用适宜的冻干保护剂(Cryoprotect-〔1〕ants),目前,有关冻干保护剂的研究主要集中于医学,生物学领域,是冷冻生物学分支的主要内容之一。但是,用于生产发酵剂的冻干保护剂的研究大多属于专利资料,而且,许多研究的报告结果差异很大。本试验利用现有条件,以蔗糖、海藻糖、侧金盏花醇等糖、醇、氨基酸、盐类对乳酸菌的冻干保护效果进行了比较研究,从而筛选良好收稿日期:1998-03-131.1材料1.1.1悬浮基质生理盐水、CMR增菌液、无脂乳固体量(NFS)为11%的脱脂复原乳,经105℃灭菌20min。1.1.2供试菌种ST-1(嗜热链球菌),LB-1(保加利亚乳杆菌),LA-1(嗜酸乳杆菌),SL(乳链球菌)。上述菌种均为本室收藏。1.1.3冻干保护剂蔗糖、乳糖、葡萄糖、麦芽糊精、山梨醇、甘露醇、甘油、三聚磷酸钠、焦磷酸钠、偏磷酸钠、-磷酸甘油二钠、Β谷氨酸钠、右旋糖苷,侧金盏花醇等均为分析纯试剂或生化试剂,谷氨酸钠为食品级,含量为99%。1.1.4真空冷冻干燥机ALPHI-5型,德国造。HYPERLINK"s://wkretype.bdimg/retype/zoom/3d474beb551810a6f524864f?pn=2&x=0&y=0&raww=200&rawh=118&o=png_6_0_0_45_1017_37_22_718.5_1057.5&type=pic&aimh=118&md5sum=a9735f1da195cedefcebf23e70ce6a52&sign=7301bd8f83&zoom=&png=14691-29207&jpg=6606-18906"\t"_blank"・372・东北农业大学学报第29卷1.1.5菌落计数培养基CMR。(配方:蛋0.3%聚乙烯醇缩甲醛氯仿溶液的网吸咐5min,在室温下干燥,再用2%的磷钨酸(pH6.8)负染色1.5～2.0min,干后在电镜白胨5g,酵母浸膏5g,葡萄糖10g,乳糖10g,乙酸钠2g,硫酸锰0.25g,硫酸镁0.25g,吐温-801g,乳蛋白水解物5g,Β-磷酸甘油二钠5g,蒸馏水1000mL,琼下观察。B.扫描电镜观察:将样品用双面胶带脂(20g)。1.1.6真空封口器与真空泵:本所自备。1.2方法1.2.1贴于扫描电镜样品台上,放入B-5型离子溅射仪中,150∼t)KyKy-1。,0.5mLh2结果与讨论2.1冷冻保护剂(单因素多水平)筛选试。冻干5～6h后逐渐升高加热板温度至15℃,以排出剩余的水分,使冻干制品的水分含量为1.50%～2.50%,然后用于测定菌落总数,水分活度,验〔4～15〕将供试菌株ST-1在CMR增菌液中培养24h,离心(3000r・min-1×5min),弃上清,生理盐水洗二次后,加入灭菌的CMR培养基25mL,使其最后的菌落数为3.5×109・mL-1,然后,分装为25