香菇多糖的提取提取工艺的制定案例南京绿叶思科药业有限公司系香港上市公司绿叶制药集团旗下全资子公司，是致力于肿瘤等领域药品的研发、生产和销售为一体的国家级高新技术制药企业。公司现有自主研发生产具有知识产权的药品包括“力扑素”（注射用紫杉醇脂质体）、“天地欣”（注射用香菇多糖）、“天地达”（注射用氨磷汀）等。其中“天地欣”是国内首家生产的“香菇多糖冻干粉针剂”，为重点国家级火炬计划项目，获得中国高新技术、新产品博览会金奖、江苏省科技进步一等奖、江苏省科技成果转化优秀项目奖等八种奖项及证书。“香菇多糖具有免疫增强作用，其机制在体内虽无直接杀伤肿瘤细胞作用，但可通过增强机体的免疫功能而发挥抗肿瘤活性。在体内能使脾脏和腹腔的NK细胞活性增强，诱生干扰素与本品剂量相关，其活性与白细胞介素类或干扰素诱导剂有协同作用。另有证明，在体外本品可增强脱氧胸腺嘧啶核苷的抗艾滋病毒的活性。香菇多糖的临床应用在医药方面的应用1.抗肿瘤与放疗、化疗、手术配合，主要用于不宜手术或复发的胃肠道肿瘤。本品加放疗、化疗治疗小细胞肺癌、乳癌、恶性淋巴瘤等。也可用于癌性胸腹水的治疗。2.抗病毒可用于乙型肝炎及艾滋病等。3.抗感染应用于具有抗药性的肺结核，也用于治疗老年性慢性支气管炎。香菇多糖的临床应用2.多糖在保健食品领域的应用香菇多糖是一种特殊的生物活性物质，是一种生物反应增强剂和调节剂，它能增强体液免疫和细胞免疫功能。香菇多糖的抗病毒作用机制可能在于其提高感染细胞免疫力，增强细胞膜的稳定性，抑制细胞病变，促进细胞修复等功能。同时，香菇多糖还具有抗逆转录病毒活性。因此，香菇多糖是一种有待开发的抗流感的保健食品。当当当当当当当当当当产品展示针剂——批准文号为“国药准字H”，属于化学类药品，已在各大医院广泛应用，且在大部分医院医保目录内。参考价格：￥255.00~255.00产品展示胶囊——批准文号为“国药准字z”，属于中成药，无副作用，已进入各大医院广泛应用，且小部分医院医保目录内。参考价格：￥328.00~360.00产品展示片剂——批准文号为“国食健字”或“食准字”，属于保健品或普通食品，无治疗效果，网上或保健品销售较多，不能进入医院销售。参考价格：￥40.00任务请同学们根据香菇提取纯化工艺，制定初步的香菇多糖的提取纯化工艺流程图。教学目标知识目标：1.了解香菇多糖性质和用途。2.掌握香菇多糖提取纯化工艺流程图的制作方法。教学目标能力目标：1.能够参考资料在教师引导下绘制香菇多糖的工艺流程图。教学目标素质目标：1.认真的工作态度。2.积极主动的学习意识。3.良好的团结协作精神。参考资料参考资料•香菇多糖的性质•香菇多糖为灰白色粉末，大多为酸性多糖，溶于水、稀碱，尤其易溶于热水，不溶于乙醇、丙酮、乙酸乙酯、乙醚等有机溶剂，其水溶液呈透明黏稠状。参考资料香菇多糖的成分每100g干香菇食用部分中含水13g、脂肪1.8g、碳水化合物54g（以半纤维素为最多，其次主要是香菇多糖）、粗纤维7.8g、灰分4.9g、钙124mg、磷415mg、铁25.3mg、维生素B10.07mg、维生素B21.13mg、尼克酸18.9mg。鲜菇除含水85-90%外，固形物中含粗蛋白19.9%，粗脂肪4%，可溶性无氮物质67%，粗纤维7%，灰分3%。参考资料1、湿菌丝体加适量蒸馏水，1:15、100℃、1h提取胞外多糖,过滤（漏斗或者纱布）后得菌渣。1:15加水，用组织捣碎机破碎后，100℃，提取1h。固液分离：（过滤、布什漏斗抽滤、压滤机压滤），溶液中为香菇胞内多糖。2、脱色。方法一：活性炭脱色,离心除去沉淀。方法二：0.4倍多糖液体积的H2O2,40℃水浴保温4h脱色。3、多糖中的蛋白质杂质的去除。方法1、盐析法：将香菇多糖液浓缩，浓缩液置于磁力搅拌器上，边搅拌边加入硫酸铵至饱和，继续搅拌30min，4000r/min离心30分钟，取上清液。方法2、三氯乙酸法：多糖水提液中滴加5%～10%与多糖水提取液等体积的三氯乙酸，混匀静置过夜，离心除去胶状沉淀，重复以上的操作直至溶液不再继续混浊为止，得无蛋白质的多糖。参考资料4、若用盐析法除杂蛋白，本步骤需要脱盐处理。脱盐方法有两种：方法1：透析技术。方法2：超滤技术。5、浓缩，醇沉香菇多糖。上清液中加入95%乙醇,使乙醇终体积分数为90%,（分离过程中加入乙醇终浓度分别为50%、70%、90%时沉淀出来的多糖）离心取沉淀即得香菇多糖粗品。56、干燥得纯品