免疫检验第十四章细胞因子的检查一、细胞因子的共同特性与作用方式CKs的共同特性1.高效性：靶细胞-受体；高亲和力结合2.多效性：一CK多靶多效3.重叠性：多CK一靶一效4.协同性：一CK强化它CK5.拮抗性：一CK抑制它CK6.网络性：多CK互相平衡三、T细胞相关细胞因子与功能第二节趋化因子及趋化因子受体的特性与功能趋化因子的生物学特性第三节细胞粘附分子与细胞粘附分子受体的特性与功能整合素家族最初是因此类粘附分子主要介导细胞与细胞外基质的粘附，使细胞得以附着而形成整体而得名。免疫系统以及神经系统和其它生物学系统中，许多参与抗原识别或细胞间相互作用的分子，具有与Ig相似的结构特征，即具有1个或多个Ig样或样结构域。这些种类繁多、分布广泛、识别功能多样的分子称之为免疫球蛋白超家族。选择素家族最初被称为外源凝集素细胞粘附分子家族（LEC-CAM家族）。钙粘蛋白是一类钙离子依赖的粘附分子家族。钙粘蛋白在维持实体组织的形成以及在生长发育过程中细胞选择性的相互聚集、重排有重要作用。TGF-:肿瘤早晚期2.均有刺激B细胞增殖的功能细胞因子与细胞粘附分子测定的临床应用对细胞因子治疗具有监测和指导用药的意义；5．如何利用细胞因子检测来判断Th1/Th2细胞平衡？酶联免疫斑点试验（enzymelinkedimmunospot,ELISPOT）（一）细胞因子检测在特定疾病诊断中的意义IFN-γ2.细胞内细胞因子的测定：（二）粘附分子检测在特定疾病诊断中的意义5．如何利用细胞因子检测来判断Th1/Th2细胞平衡？IL-184.细胞因子或粘附分子的细胞内定位检测：相应细胞整合素家族最初是因此类粘附分子主要介导细胞与细胞外基质的粘附，使细胞得以附着而形成整体而得名。基于DNA检测的分子生物学测定法：淋巴细胞活化的辅助信号分子协同性：一CK强化它CK细胞因子的检测方法多种多样，各有利弊。淋巴细胞活化的辅助信号分子介导白细胞与血管内皮细胞粘附介导淋巴细胞归巢辅助受体和辅助活化信号是指免疫细胞在接受抗原刺激的同时，还必须有辅助的受体接受辅助活化信号才能被活化。最为常见的提供辅助刺激信号的T细胞上粘附分子结合抗原提呈细胞（APC）上相应粘附分子有：CD4/MHCⅡ类分子、CD8/MHCⅠ类分子、CD28/CD80及CD86、CD2/CD58、LFA-1/ICAM-1等。T细胞识别APC细胞提呈的抗原后，如缺乏粘附分子提供的辅助刺激信号，则T细胞的应答处于无能状态。淋巴细胞归巢是淋巴细胞的定向游动，包括淋巴干细胞向中枢淋巴器官归巢，成熟淋巴细胞向外周淋巴器官归巢，第四节临床常用的测定方法1.基于DNA检测的分子生物学测定法：DNA扩增法RNA印迹法原位杂交法核酸酶保护分析2.生物活性测定法根据细胞因子特定的生物学活性,应用相应的指示系统,同时与标准品对比测定,从而得知样品中细胞因子的活性水平,一般以活性单位(U/ml)表示敏感性较高特异性不高操作繁琐易受干扰免疫学测定法介导白细胞与血管内皮细胞粘附三、评估机体的免疫状态、判断治疗效果及预后第三节细胞粘附分子与细胞粘附分子受体的特性与功能整合素家族最初是因此类粘附分子主要介导细胞与细胞外基质的粘附，使细胞得以附着而形成整体而得名。（二）粘附分子检测在特定疾病诊断中的意义基因分析法：利于细胞内定位分析、操作烦琐免疫系统以及神经系统和其它生物学系统中，许多参与抗原识别或细胞间相互作用的分子，具有与Ig相似的结构特征，即具有1个或多个Ig样或样结构域。1、趋化移行效应：趋化单核细胞向炎症部位移行对细胞因子治疗具有监测和指导用药的意义；第二节趋化因子及趋化因子受体的特性与功能细胞体外培养后的培养上清液3．ELISPOT的原理、用途、与ELISA的异同是什么？ELISPOT方法学评价5．如何利用细胞因子检测来判断Th1/Th2细胞平衡？钙粘蛋白在维持实体组织的形成以及在生长发育过程中细胞选择性的相互聚集、重排有重要作用。5．如何利用细胞因子检测来判断Th1/Th2细胞平衡？标本中细胞因子的可溶性受体，会影响特异性抗体对细胞因子的结合敏感性偏低不能判断细胞因子的生物学活性。二、流式细胞分析法细胞表面的粘附分子或细胞因子受体？区分不同分泌特性的细胞亚群：Th1细胞IFN-γTh2细胞IL-4三、酶联免疫斑点试验(enzymelinkedimmunospot,ELISPOT)1个斑点代表1个细胞因子分泌细胞，斑点的颜色深浅程度与细胞分泌的细胞因子量相关。ELISPOT方法学评价四、其他检测技术第五节细胞因子与细胞粘附分子测定的临床应用一、临床应用原则细胞因子的检测方法多种多样，各有利弊。高敏感性方法：特异性的降低、