第四章毒理作用机制第一节概述二、一般毒性的概念和分类一般毒性通常也称基础毒性包括：急性毒性蓄积毒性亚急性或亚慢性毒性慢性毒性特殊毒性－－主要是指致癌作用、致突变作用、致畸和遗传毒性等三、一般毒性试验在食品安全性评价程序中的地位预备/准备阶段：了解食品毒物的理化性质、收集毒性研究资料第一阶段：急性毒性试验(致死和非致死)第二阶段：亚急性或亚慢性毒性试验（1个月喂养试验）、代谢试验、蓄积毒性、遗传毒性试验、致畸试验第三阶段：亚慢性毒性试验（3～6个月喂养试验）、繁殖试验、代谢试验、蓄积毒性第四阶段：慢性毒性试验（6个月至终生试验）、致癌试验第二节食品毒物的急性毒性一、急性毒性和急性毒性试验的目的急性毒性参数二、急性毒性试验1．试验动物的种属和品系最好用两种种属的动物啮齿类:小鼠、大鼠、豚鼠或家兔非啮齿类：狗或猴。急性皮肤毒性试验可选用成年大鼠、豚鼠或家兔，优先考虑白色家兔。而急性吸入毒性试验和经口急性毒性试验则优先考虑大鼠。⒉试验动物的年龄和体重：通常要求选择刚成年动物进行试验，而且须是未曾交配和受孕的动物，使实验结果具有代表性和可重复性。例如：大鼠180～240g、小鼠18～25g、家兔2～2.5kg、豚鼠200～250g、狗10～15kg。同一批试验动物体重变异范围不应超过该批动物平均体重的20％。3.试验动物的性别：一般要求为雌雄各半。如果着重观察受试物对雄性动物生殖功能的影响－－应选用雄性动物如果试验是为致畸试验－－则选雌性动物4.动物数量与随机分组：小鼠：每组不少于10只大鼠：每组6～8只家兔、狗等大动物：每组4～6只分组原则——随机化原则5.禁食：经消化道染毒时，要求试验前对动物禁食大鼠、大型动物——隔夜禁食；小鼠－－禁食4h染毒后继续禁食2~4h，但在禁食时要保障饮水。6.实验动物的预检：选择健康动物1~2周的检疫期动物购来后适应饲料和环境3d～5d（二）试验动物的饲养环境恒定的温度：22±3℃湿度：30~70%照度：昼夜各半饲料合格、饮水合格、垫料合格（三）染毒途径的选择模拟人在生活和生产环境中实际接触受试物的途径和方式；有利于不同化学物之间急性毒性大小的比较；受试物的性质和用途；各种受试物毒性评价程序的要求等。最常用的染毒途径为经口、经呼吸道、经皮及注射途径。1.经口(胃肠道)接触:灌胃：小鼠0.20.7ml/20g大鼠1～4ml/200g，不超过5ml/只家兔不超过10ml/2kg狗不超过50ml/10kg混入饲料或饮水：吞咽胶囊：2.经呼吸道接触:静式吸入动式吸入3.经皮肤接触:4.注射途径接触:对各个毒理学试验应该用同一种、同一批号受试物受试物成分和配方必须固定；如是异构体混合物，异构体比例必须固定；活性成分的百分含量和可检测的杂质的浓度固定；受试物在贮存期内稳定性和在饲料中的稳定性必须进行研究并报告；受试物应一次备齐全部实验的用量。（五）染毒剂量与分组1．查阅文献①了解化学毒物的结构式、分子量、常温常压下的状态、熔点、沸点、密度、挥发度、蒸气压、水溶性和脂溶性等理化特性，生产批号及纯度，杂质成分与含量等。②确定使用哪一种计算方法求LD50，然后再设计剂量分组。LD50的计算方法常用寇氏法、概率单位法、霍思法等。③找出与受试物结构与理化性质近似的化学物的毒性资料，并以文献资料中相同的动物种系和相同接触途径所测得的LD50(LC50)值作为受试物的预期毒性中值。（五）染毒剂量与分组2．预试验①设定以此预期值作为待测化学物的中间剂量组，并在该剂量的上下各设计l一2个剂量组作为预试验剂量。②根据确定的剂量组进行染毒。③根据预试验的死亡资料确定组距。可根据以下公式计算出剂量分组：i=(lgLD90-lgLD10)／(n-1)或：i=(lgLD100-lgLD0)／(n-1)式中i为组距(相邻的两个剂量组对数剂量之差)；n为设计的剂量组数。（五）染毒剂量与分组:3．正式试验一般来说、根据试验设计所选用的LD50计算方法来确定组数。例如概率单位法、寇氏法一般设5～10个剂量组；霍恩法固定设4个剂量组。求得i值后．以最低剂量组(LD0或LD10)的对数剂量加上一个i值，即是第二个剂量组的对数剂量，依此类推直至最高剂量组，查各自的反对数即得出各组剂量的真实值。123456LgLD0LgLD0+iLgLD0+2iLgLD0+3iLgLD0+4i•••（六）试验周期与毒效应观察1.中毒症状（六）试验周期与毒效应观察2.体重变化体重可以反映动物中毒后的整体变化。体重改变的原因很多，因此对存活动物尤其是对低于LD50剂量组的存活动物，应