淋病的实验室检测及质控结果分析.ppt[兼容模式]（完整版）实用资料(可以直接使用，可编辑完整版实用资料，欢迎下载）淋病的实验室诊断中国CDC性病控制中心参比实验室戴秀芹淋病是我国性病的主要病种，被列为法定报告的乙类传染病之一。n淋病的主要临床表现为泌尿生殖道的化脓性感染，如淋菌性尿道炎、淋菌性宫颈炎等。临床上也有部分病人呈现无症状或症状轻,尤其是女性患者，如不及时处理，感染上行将导致严重后果，如终身不孕等。n淋病的病原体是淋病奈瑟菌，简称为淋球菌，好侵犯人类泌尿生殖道的柱状上皮细胞。n淋病的实验室诊断主要是显微镜检查法和培养法。nn取材方法的正确与否将直接影响其病原学的检测。n男性病人取材分泌物明显：须挤出新鲜的脓液，用无菌拭子蘸取即可。分泌物不明显：待病人排尿1~2小时后，用无菌拭子插入尿道口2cm~4cm，转动并停留数秒。n女性病人取材分泌物较多：用第1根无菌拭子擦去宫颈口分泌物，第2根无菌拭子插入宫颈口1cm~1.5cm转动并停留数秒。无分泌物：可直接用无菌拭子插入宫颈口1cm~1.5cm转动并停留数秒。注意事项n采样准备时：宜用生理盐水，忌用消毒剂或润滑剂。n采样时：宜用藻蛋白钙盐纤维或人造纤维拭子，忌用棉拭子。n采样完：宜立即接种并保温，忌放冰箱。标本的运送n淋球菌对外界环境的抵抗力较弱，对热敏感，不耐干燥。n为保证培养成功，标本采集后，需立即接种淋球菌分离培养基。n如不能立即接种，需采用非营养运送培养基，于12小时内送到实验室接种。nnnnn操作步骤涂片固定染色镜检nnnnn注意事项轻轻滚动、厚薄适宜自然干燥、待干固定脱色适宜、避免过度先低倍、再油镜nnnn右图为革兰染色油镜视野下观察见到多形核白细胞内G-双球菌主要见于男性急性淋菌性尿道炎患者nn结果报告阳性：见到细胞内-G双球菌可疑：见到细胞外G-双球菌-阴性：未见G双球菌nn临床意义用于男性急性淋菌性尿道炎患者的初步诊断。见于病程较长的淋病病人，需做培养并进一步鉴定。nnn淋球菌的分离培养nnn操作步骤接种培养nn注意事项培养基培养基的选择、室温平衡、分区划线培养的条件温度、CO2及湿度n淋球菌的分离培养nnnn淋球菌初步鉴定试验菌落形态氧化酶试验革兰染色nnn淋球菌确证试验糖发酵荧光抗体----初步鉴定试验nn结果观察菌落形态：培养24~36小时，细小、光滑、湿润、凸起、半透明或灰白色、有粘性。氧化酶试剂：盐酸二甲基对苯二胺，氧化酶阳性菌落变紫红色；盐酸四甲基对苯二胺，氧化酶阳性菌落变紫兰色。-革兰染色：菌体形态为G双球菌，呈红色、肾形排列。nn----初步鉴定试验nn结果报告阳性：经过48小时培养，对疑似的淋球菌菌落作氧化酶试验、革兰染色可初步报告。阴性：培养48小时后仍无淋球菌特征菌落生长。nn临床意义用于女性患者及症状轻或无症状的男性患者的诊断。用于特殊需要：如淋球菌药敏试验等。nn----确证试验（糖发酵）n操作步骤nnnnnnnn注意事项n菌落分纯制备菌悬液准备糖管加入平衡盐指示液加入菌悬液孵育或水浴观察结果nn挑取单个菌落，转种到增菌培养基，培养16~18小时。菌悬液浓度﹥109cfu/ml糖的纯度要高，尤其是麦芽糖----确证试验nn结果判读淋球菌仅发酵葡萄糖，产酸不产气，不发酵其他糖类。因此葡萄糖的颜色由红变黄，其他糖管颜色不变。淋球菌的分离培养----确证试验nn结果报告阳性：出现上述特征性反应即为阳性。阴性：未出现上述特征性反应即为阴性。nn临床意义用于泌尿生殖器以外部位的淋病患者的诊断，例如：咽部和直肠等。n淋球菌的保存方法n保存液nn保存形式nnnnnn脱脂牛奶或脱脂奶粉甘油脑心浸出液甘油胰酶大豆肉汤甘油小牛血清低温液氮冷冻干燥结果分析nn回报情况未参评省份参评省份结果回报率参评合格率nnnnnn考核样本的正确率淋球菌淋球菌混合菌非淋球菌非淋球菌存在的问题nnn工作不够细心：例鉴定结果未填写或结果填报错误。回报表填写不完整：如自制试剂未填写批号/有效期、未选择使用的鉴定方法、实验人员及实验负责人未签字等。未按要求填报结果：例初步鉴定结果填报：有-+填疑似淋球菌、奈瑟氏菌属、G/G双球菌、中文表示、+/-表示等。存在的问题nnn概念不清：对淋球菌菌体概念不清，革兰染色结果描述错误较多；菌落形态与菌体形态概念混淆。对鉴定结果的填报较随意：未做糖发酵试验却填报确证试验结果。混合菌的符合率较低：与使用的培养基以及实验技术人员的技术能力有关。