会计学一、Folin酚试剂法(Lowry法)【实验原理】1.实验器材100毫升容量瓶2只；移液管1毫升4支，5毫升2支；分光光度计。2.实验试剂(1)Fo1in酚试剂甲：将lg碳酸钠溶于／L氢氧化钠溶液中，再把硫酸铜(CuSO4∙5H2O)溶于100mL1％酒石酸钾(或酒石酸钠)溶液，然后将前者50mL与后者lmL混合。混合后1日内使用有效。(2)Folin酚试剂乙：在容积的磨口回流瓶中加入100g钨酸钠(Na2WO4∙2H2O)、25g钼酸钠(Na2MoO4∙2H2O)、700mL蒸馏水、50mL85％磷酸及100mL浓盐酸，充分混匀后回流10h。回流完毕，再加150g硫酸锂、50mL蒸馏水及数滴液体溴，开口继续沸腾15分钟，以便驱除过量的溴，冷却后定容到1000mL。过滤，如显绿色，可加溴水数滴使氧化至溶液呈淡黄色。置于棕色瓶中暗处保存。【实验材料】【实验操作】1.绘制标准曲线取7支试管，按下表分别加入各试剂二、紫外吸收法【实验目的】1.学习紫外吸收法测定蛋白质含量的原理。2.掌握紫外分光光度计的操作方法。【实验原理】大多数蛋白质分子结构中含有芳香族氨基酸（酪氨酸和色氨酸）残基，使蛋白质在280nm的紫外光区产生最大吸收，并且这一波长范围内的吸收值与蛋白质浓度的成正比，利用这一特性可定量测定蛋白质的含量。紫外吸收法可测定的蛋白质溶液，此操作简便，测定迅速，不消耗样品，低浓度盐类不干扰测定。因此，此法在蛋白质的制备中广泛应用。【实验材料】1.实验器材试管及试管架；50毫升容量瓶2只；移液管；紫外分光光度计。2.实验试剂(1)标准蛋白质溶液：精确配制2mg／mL的酪蛋白溶液。(2)样品溶液：配制约的酪蛋白溶液作为未知样品溶液。【实验操作】1.绘制标准曲线取7支试管按下列各表加入各试剂：试剂加完后摇匀，在紫外分光光度计上，于280nm处以0号管为对照，分别测定各管溶液的光密度值。以光密度为纵座标，标准蛋白溶液浓度为横座标，绘制出标准曲线。2.测定未知样品取样品溶液4毫升,加蒸馏水4mL混匀，在280nm下测定其光密度值。【实验结果】根据样品溶液的光密度值，在绘制好的标准曲线图中查出样品溶液的蛋白质含量。三、微量凯氏定氮法【实验目的】学习凯氏定氮法的原理和操作技术。【实验原理】凯氏定氮法用于测定有机物的含氮量,若蛋白质的含氮量已知时，则可用此法测定样品中蛋白质的含量。当蛋白质与浓硫酸共热时，其中的碳、氢两元素被氧化成二氧化碳和水，而氮则转变成氨，并进一步与硫酸作用生成硫酸铵。此过程通常称为“消化”。但是，这个反应进行得比较缓慢，通常需要加入硫酸钾或硫酸钠以提高反应液的沸点，并加入硫酸铜作为催化剂，以促进反应的进行。消化完成后，在凯氏定氮仪中加入浓碱，可使消化液中的硫酸铵分解，游离出氨，借助水蒸汽蒸馏法，将产生的氨蒸馏到一定量、一定浓度的硼酸溶液中，硼酸吸收氨后，氨与溶液中氢离子结合，使溶液中的氢离子浓度降低，指示剂颜色改变，然后用标准无机盐酸滴定，直至恢复溶液中原来的氢离子浓度为止。根据所用标准盐酸的量可计算出待测物中的总氮量。蛋白质的含氮量为16%，即1克蛋白质中的氮相当于克蛋白质，用凯氏定氮法测出的含氮量乘以6.25,即得样品中蛋白质的含量。【实验材料】1.实验器材微量凯氏定氮仪1套；50mL凯氏烧瓶4个；移液管；锥形瓶；试管；小玻璃珠2.试验试剂(1)浓硫酸；30％氢氧化钠溶液；2％硼酸溶液；标准盐酸溶液／L)。(2)粉末硫酸钾—硫酸铜混合物：K2SO4与CuSO4∙5H2O以3：1配比研磨混合。(3)混合指示剂(田氏指示剂)：由％甲烯蓝乙醇溶液与％甲基红乙醇溶液混合配成，贮于棕色瓶中备用。(4)样品溶液：配制3mg/mL的牛血清白蛋白溶液作为样品。【实验操作】【实验操作】【实验操作】【实验结果】四、二喹啉甲酸法(BCA法)【实验材料】【实验操作】。五、考马斯亮蓝染料结合比色法【实验材料】【实验方法】【实验结果】