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黄曲霉毒素的测定黄曲霉毒素属剧毒物质,其毒性比氰化钾还高,也是目前最强的化学致癌物质。其中AFTB1的毒性和致癌性最强,帮其在食品中允许量各国都有严格规定。AFT主要污染粮油及其制品,如花生、花生油、玉米、大米、棉籽等被污染严重。黄曲霉毒素允许量标准本章重点。仪器试剂吸附剂--硅胶黄曲霉毒素B1标准溶液2、黄曲霉毒素B标准使用液:I液(1.0ug/mL):取1mLAFTB标准液(10.0ug/mL)于10mL容量瓶中,用苯一乙腈混合液稀释、定容。Ⅱ液(0.2ug/mL):取I液1mL,按上法定容5mL。Ⅲ液(0.04ug/mL):取液Ⅱ1mI。,按上法定容5mI。。思考:在配制黄曲霉毒素B标准使用液时,为什么需要用贮备液来稀释而不是直接配制?次氯酸钠溶液操作步骤(1)样品处理(2)提取浓缩测定--单向展开法点样展开与观察确证试验按上法展开并观察,样液是否产生与AFTB1标准点相同的衍生物。未加三氟乙酸的三、四两点,可依次作为标准与标准的衍生物空白对照。④稀释定量:样液中的AFTB1荧光点的荧光强度,如与AFTB1。标准点最低检出量(0.0004μg)的荧光强度一致,则样品中AFTB1含量为即为5~g/kg.若样液中荧光强度比最低检出量强,则根据其强度估计,减少滴加微升数,或将样液稀释后再滴加不同微升数,直至样液的荧光强度与最低检出量的荧光强度一致为止。滴加式样如下:第一点:l0uLAFTB1,标准使用液(0.04ug/mL)。第二点:根据情况滴加10uL样液。第三点:根据情况滴加15uL样液。第四点:根据情况滴加20uL样液。4)结果计算X=式中:X一样品中AFTBl的含量,ug/kg;V1一加入苯一乙腈混合液的体积,mL;V2—出现最低荧光时滴加样液的体积,mL;D一样液的总稀释倍数;m1—加入苯一乙腈混合液溶解时相当样品的质量,g;0.0004—AFTBl的最低检出限量,ug。测定--双向展开法操作步骤(2)展开:a.横向展开:在展开槽内的长边置一玻璃支架,加10mL无水乙醇,将上述点好的薄层板靠标准点的长边,置于展开槽内展开,展至板端后,取出挥干。根据情况,需要时,可再重复l~2次。b.纵向展开:挥干的薄层板以丙酮一三氯甲烷(8:92)展开至10~12cm为止。丙酮与氯甲烷的比例,根据不同条件自行调节。观察与评定结果确认试验(5)稀释定量:若样液中AFTBl含量较高,可按单向展开法中(5)稀释定量操作。若AFTB1含量较低,稀释倍数小,在定量的纵向展开板上仍有杂质干扰,影响结果判断,可将样液再做双向展开法测定,以确定含量。3.2.3结果计算同单向展开法。3.2.4说明及注意事项用过后受污染的玻璃器皿,应经次氯酸溶液(25g/L),浸泡消毒后再清洗之。