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一、DNA指导下RNA的合成(转录)转录(transcription):以DNA单链为模板,NTP为原料,在DNA依赖的RNA聚合酶催化下合成RNA链的过程。转录的条件:模板链:反意义链(antisensestrand,(-)链)——以该链中的DNA碱基顺序指导RNA的合成即被转录的那条DNA链。不对称转录.DNA双链上,仅一股链转录,另一股不转录。.有意义链与反意义链并非固定不变。.转录方向都是5’3’(一)RNA聚合酶——依赖DNA的RNA聚合酶(DNA-dependentRNApolymerase,DDRP)1、大肠杆菌RNA聚合酶的组成(1)全酶(holoenzyme)由4种(5个)亚基α2ββ’σ组成(2)核心酶(coreenzyme)α2ββ’,参与转录的全过程(3)σ亚基(起始亚基)亦称σ因子(σfactor)—转录辅助因子识别启动子ω亚基功能未知大肠杆菌RNA聚合酶的结构示意图全酶核心酶全酶=α2ββ’(ω)σ核心酶=α2ββ’σ—开始合成RNA链时必需有σ因子,一旦合成开始即释放出来β’—参与酶与底物的结合,以及与σ因子和核心酶的结合β—参与σ因子和核心酶的结合,并参与RNA合成的引发、延伸α—与结合模板、酶的滑动及碱基识别有关起始2.真核细胞RNA聚合酶在DEAE-Sephadex柱上的洗脱次序称为酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ二、RNA的转录后加工/成熟(post-transcriptionalprocessing)mRNA可直接作为翻译的模板rRNAtRNA1、rRNA的加工RNaseP2、tRNA的加工●加工(二)真核生物RNA转录后的加工1、rRNA转录后的加工RNaseⅢ核酸内切酶2、tRNA的加工3、真核生物的mRNA转录后加工加帽加尾mRNA前体的剪接5pppGp…帽0帽Ⅰ帽Ⅱ三、在RNA指导下RNA和DNA的合成(二)RNA的逆转录以RNA为模板,有逆转录酶的参与,在4种dNTP存在及适合的条件下,按碱基配对的原则,合成cDNA(complementaryDNA,cDNA)的过程。1、逆转录酶(reversetranscriptase)RNA依赖的DNA聚合酶(RDDP)这种酶以RNA为模板,在4种dNTP存在及适合的条件下,按碱基配对的原则,合成cDNA(cDNA中无内含子)。催化三种反应:RNA指导的DNA合成RNA水解DNA指导的DNA合成ASVRNA