[考纲要求]1．PCR技术的基本操作和应用。2.蛋白质的提取和分离。3.从生物材料中提取某些特定的成分。4.实验：DNA的粗提取与鉴定。1．基本原理2．操作过程材料的选取：选用_____含量相对较高的生物组织↓破碎细胞(以鸡血为例)：鸡血细胞，加________，用玻璃棒搅拌，用纱布过滤，收集滤液↓去除杂质：利用DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度的不同，通过控制___________________去除杂质↓DNA析出：将处理后的溶液过滤，加入与滤液体积相等的、冷却的体积分数为__________________溶液↓DNA的鉴定：在溶有DNA的溶液中加入二苯胺试剂，_________________5min，溶液变成蓝色1．正误判断(1)DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，在0.14mol/L的NaCl溶液中溶解度最低()(2)DNA不溶于冷酒精，可用酒精进一步提取DNA()(3)DNA与二苯胺溶液反应生成紫色物质()(4)酵母和菜花均可作为提取DNA的材料()(5)DNA既溶于2mol/LNaCl溶液也溶于蒸馏水()(6)向鸡血细胞液中加蒸馏水搅拌，可见玻棒上有白色絮状物()(7)DNA溶液加入二苯胺试剂沸水浴加热，冷却后变蓝()2．下图为“DNA粗提取和鉴定”实验的相关操作，请仔细观察并分析①～④操作的目的分别是什么？①________________②________________③________________④________________答案①是使鸡血细胞吸水涨破释放出核物质；②是析出DNA，去除溶于酒精的杂质；③是使DNA溶解在2mol/LNaCl溶液中；④是稀释NaCl溶液使其浓度接近0.14mol·L－1，去除溶于低浓度NaCl溶液的杂质。1．DNA粗提取与鉴定中不同试剂的用途及原理比较酒精2.DNA粗提取实验材料和方法的选择(1)不同生物的组织中DNA含量不同在选取材料时，应本着DNA含量高、材料易得、便于提取的原则。(2)材料不同所采用的提取方法不同①植物组织：取材→研磨→过滤→沉淀。②鸡血：制备鸡血细胞液→提取核DNA→溶解细胞核内DNA→析出并滤取DNA→DNA再溶解→提取较纯净的DNA。【易错警示】DNA粗提取与鉴定实验的易错点(1)本实验不能用哺乳动物成熟红细胞作实验材料，原因是哺乳动物成熟红细胞无细胞核。可选用鸡血细胞作材料。(2)实验中两次使用蒸馏水，第一次的目的是使成熟的鸡血细胞涨破放出DNA，第二次的目的是稀释NaCl溶液，使DNA从溶液中析出。1．某生物兴趣小组开展DNA粗提取的相关探究活动，具体步骤如下：材料处理：称取新鲜的花菜、辣椒和蒜黄各2份，每份10g。剪碎后分成两组，一组置于20℃、另一组置于－20℃条件下保存24h。DNA粗提取：第一步：将上述材料分别放入研钵中，各加入15mL研磨液，充分研磨。用两层纱布过滤，取滤液备用。第二步：先向6只小烧杯中分别注入10mL滤液，再加入20mL体积分数为95%的冷酒精溶液，然后用玻璃棒缓缓地向一个方向搅拌，使絮状物缠绕在玻璃棒上。第三步：取6支试管，分别加入等量的2mol/L的NaCl溶液溶解上述絮状物。DNA检测：在上述试管中各加入4mL二苯胺试剂，混合均匀后，置于沸水中加热5min，待试管冷却后比较溶液的颜色深浅，结果如下表。分析上述实验过程，回答下列问题：(1)该探究性实验课题名称是_________________________________________________________________。(2)第二步中“缓缓地”搅拌，这是为了减少______________________________________________________________。(3)根据实验结果，得出结论并分析。①结论1：与20℃相比，相同实验材料在－20℃条件下保存，DNA的提取量较多。结论2：________________________________。②针对结论1，请提出合理的解释：______________________________。(4)氯仿密度大于水，能使蛋白质变性沉淀，与水和DNA均不相溶，且对DNA影响极小。为了进一步提高DNA纯度，依据氯仿的特性，在DNA粗提取第三步的基础上继续操作的步骤是：________________________________________，然后用体积分数为95%的冷酒精溶液使DNA析出。解析(1)该实验中把不同的材料在不同条件(温度)下处理，目的是探究不同材料和不同保存温度对DNA提取量的影响。(2)“缓缓地”搅拌是为了减少DNA断裂。(3)分析表格可得出结论：①相同材料在－