5-1雜菌的分析及防治二、雜菌汙染的原因分析三種主要型態種原帶菌、製程染菌與設備、管路方面的異常將簡單說明如何判斷染菌的途徑與檢討發生的原因。若感染的雜菌是耐高溫的菌種推測是設備、管路與培養基的滅菌不完全所造成。若感染的雜菌為不耐熱的菌種，則可能是前培養發生感染、管路設備有滲漏或是操作過程發生異常。發酵槽同時或先後被感染，可能是供氣系統無法確實除菌，造成相同氣源的發酵槽感染雜菌。如果單一發酵槽屢次污染雜菌，一般是該設備、管路發生異常三、雜菌汙染的防止1.種源污染菌種在保存過程中受到污染的原因因為空氣會從試管的管口、培養皿的蓋口進入到原本無菌的環境中2.製程染菌(1)培養基滅菌不完滅菌時間不足培養基的內部未達到預設的滅菌溫度(2)接菌過程不嚴謹每次接菌都有染菌的風險因此嚴謹的接菌程序與操作方式才能有效降低製程染菌的風險3.設備、管路系統異常設計與安裝，需盡量避免產生死角5-2滅菌的方法與原理2.乾熱滅菌法直接使用火焰（酒精燈或瓦斯燈）作為滅菌的方法高溫的熱空氣主要是使用在需要保持乾燥的基質上3.放射線滅菌法紫外光線、微波、γ射線、X射線:利用γ-ray或β-ray之離子化過程的能量轉變成熱及化學能，破壞微生物的遺傳因子DNA，以達到殺死微生物的效果。離子放射線穿透力高，價格昂貴，須特殊儀器、裝備及防護措施。紫外線殺菌的原理是利用短波長的高能量，破壞細胞內的去氧核糖核酸(DNA)使其產生變異微波的應用方式則是以放射出來微波，來對水分子做高頻震盪使之產生熱能4.過濾除菌熱敏感的氣體或液體的滅菌方式，通常是採用過濾的方式來除去雜菌二、化學法滅菌化學滅菌，主要是使用化學藥劑如乙醇進行器具、基質以及局部無菌區域的滅菌氧化乙烯（ethyleneoxide）氣體滅菌：可處理不耐熱醫療器材，滅菌鍋容量大，無腐蝕性，可透過所有透氣物品。對環境有毒性殘存，影響工作人員健康，須長時間排氣，滅菌週期長。戊乙醛液體滅菌：處理不耐熱醫療器材，對金屬腐蝕性低，在有效期限內可重複使用。滅菌時間長，3-10h，對環境環境會有毒性殘存（＜0.2ppm），只能使用浸泡滅菌法，且要無菌水沖洗，無法使用生物指示劑來監測。過醋酸液體滅菌：滅菌時間短，30-40min，對環境無毒性殘存（醋酸、氧氣及水），不影響工作人員健康，適合任何材質及器械。不適用於鋁製品或鋁合金，會破壞表面金屬光澤，只能使用浸泡滅菌法，無法使用生物指示劑來監測，每次只能處理少量物品。消毒：(一）、高程度消毒劑可用於殺滅非芽胞的微生物，即可殺死細菌的繁殖體、結核菌、黴菌及病毒。一般消毒時間至少20分鐘。常用消毒劑如下：1.2﹪戊乙醛（glutaraldehyde）如鹼性戊乙醛（商品名：Cidex、Cido-dur、Wavicide）。2.6﹪過氧化氫（hydrogenperoxide）。3.過醋酸（peraceticacid）。4.鄰苯二甲醛(ortho-phthalaldehyde;OPA)5.次氯酸水溶液（sodiumhypochlorite）>1000ppm，一般家用漂白水稀釋10倍(1份漂白水加9份水)之濃度為5000ppm。6.巴斯德消毒（Pasteurization）則是在水中加熱75℃x30min。(二）中程度消毒劑則是用於皮膚消毒或水療池的消毒，可用殺死細菌的繁殖體、結核菌、部分黴菌、部分親水性病毒、及親脂性病毒。常用消毒劑：1.10﹪優碘（iodine），>30sec。2.70﹪(v/v)酒精待乾燥後即可。(三）低程度的消毒劑，可用殺死細菌的繁殖體、部分黴菌及親脂性病毒。一般消毒時間為10min。常用消毒劑如下：1.酚化合物（phenolics）。2.四級胺化合物（quaternayammoniumcompounds)，僅當清潔劑。3.氯胍（chlorhexidinegluconate）。4.較低濃度的次氯酸水溶液三、滅菌的死滅動力學1.培養基滅菌極端的環境條件也會使營養成份受到破壞2.熱滅菌動力學微生物是由複雜的蛋白質所組成3.滅菌時間的決定N/N0=0.001作為參考標準，也就是說1000次滅菌中會有1次滅菌失敗的可能4.滅菌溫度的計算再將值帶入式3中5.滅菌操作(1)空槽滅菌空槽滅菌就是直接對未添加培養基的發酵槽進行高壓蒸氣滅菌(2)實槽滅菌對具有培養基的發酵槽，通入高壓蒸汽來進行滅菌程序