蛋白质的结构蛋白质的一级结构又称初级结构，二级结构、三级结构、四级结构的三度空间排列称蛋白质的空间结构/高级结构/三维结构或构象。蛋白质的一级结构（化学结构）举例关于蛋白质一级结构序列的测定问题（1）末端分析：包括N端分析，C端分析N端氨基封闭的几种情况（1）末端分析：包括N端分析，C端分析（2）肽链的拆开和分离（3）肽链的部分水解酶解方法氨基酸序列测定（5）找重叠肽从而推断整个肽链的氨基酸序列Gly-Lys-Asn-Tyr蛋白质测序举例一级结构测定展望（二）蛋白质的空间结构（构象、高级结构）1.蛋白质空间结构的研究方法X-射线衍射法2.蛋白质的二级结构早在20世纪30年代，Pauling和Corey就开始有X-射线衍射方法研究了氨基酸和肽的结构，他们得到了重要的结论:肽键的键长介于C-N单键和双键之间，具有部分双键的性质，不能自由旋转。肽键中的四个原子和它相邻的两个α-碳原子处于同一平面，形成了酰胺平面，也称肽键平面。在酰胺平面中C=0与N-H呈反式。(1)α-螺旋α-螺旋结构的要点如下：一些侧链基团虽然不参与螺旋，但他们可影响α-螺旋的稳定性一些侧链基团虽然不参与螺旋，但他们可影响α-螺旋的稳定性(2)β-折叠(3)β-转角(β-turn)(4)无规卷曲(5)Ω环3.蛋白质的超二级结构和结构域βxβ：是两段平行的β-折叠通过一段连接链x连接而形成的结构。如x为α-螺旋则为βαβ；最常见的为两个βαβ聚集体连在一起形成βαβαβ结构，称Rossmann折叠。β-曲折（β-meander）：β-折叠筒（β-sheatbarrel）结构域是1970年Edelman提出的，它是指在较大的球状蛋白质分子中，多肽链往往形成几个紧密的球状构象，彼此分开，以松散的肽链相连，此球状构象就是结构域。对那些较小的蛋白质分子来说，结构域和三级结构往往是一个意思，也就是说是单结构域的。一般来说，大的蛋白质分子可以由2个或更多个结构域组成。结构域有时也称功能域，功能域是指有功能的部分。功能域可以是一个结构域，也可以是两个或两个以上的结构域组成。4.蛋白质的三级结构下面以鲸肌红蛋白为例，说明蛋白质的三级结构，1963年Kendrew等通过鲸肌红蛋白的x-射线衍射分析，测得了它的空间结构。球状蛋白二、三级结构的共同特点5.蛋白质的四级结构以血红蛋白（hemoglobin）为例，说明蛋白质的四级结构，血红蛋白是由四个亚基组成，2个α-亚基，2个β-亚基，每个亚基由一条多肽链与一个血红素辅基组成。４个亚基以正四面体的方式排列，彼此之间以非共价键相连（主要是离子键、氢键）。6．纤维状蛋白质的构象（2）丝心蛋白（也称丝蛋白，fibroin）（3）胶原蛋白（collagen）7.维持蛋白质构象的化学键六、蛋白质的理化性质（一）胶体性质（二）酸碱性质和等电点每种蛋白质都有它特有的等电点，这也是鉴别蛋白质的指标之一。3.等离子点（三）电泳(四)变性作用（denaturation）（六）沉淀作用（七）沉降作用七、蛋白质结构与功能的关系HbA（adulthemoglobin）HbS（sickle-cellhemoglobin）2．激素和它的前体分子（二）蛋白质的空间结构与功能的关系血红蛋白由两个α-亚基和两个β-亚基组成四聚体（α2β2），有稳定的四级结构，与氧的亲和力很弱，但当氧与血红蛋白分子中一个亚基的血红素辅基的铁结合后，即引起该亚基构象的改变，一个亚基构象的改变又会引起其余亚基的构象相继发生改变，亚基间的次级键被破坏，整个分子从紧密的构象变成比较松散的构象，易于与氧结合，使血红蛋白与氧结合的速度大大加快。5．波耳（Bohr）效应6.2，3一二磷酸甘油酸对Hb氧合的影响八、蛋白质的分离、纯化和鉴定八、蛋白质的分离、纯化和鉴定（二）抽提（三）分离5.透析和超滤（四）纯化（四）纯化（五）鉴定（五）鉴定（2）凝胶过滤法4．生物活性的测定与你分享ThankYou!