生物制药工艺学《生物制药工艺学》主要参考书生物制药工艺学Biopharmaceuticalprocess第一章生物药物概述IntroductionofBiopharmaceutics生物药物Biopharmaceutics第一节生物药物的研究与发展前景二、生物药物的发展与展望第二节生物药物的性质与类别第二章生物制药工艺技术基础Basisofbiopharmaceuticaltechnology第一节微生物制药工艺技术基础2．诱变育种（1）诱变处理：①化学诱变；②物理诱变（2）代谢调节选育（3）基因重组技术改变代谢途径（4）原生质体融合突变株筛选一般进程如图所示第三第四轮同第二轮3．菌种保存二、发酵工程技术基础发酵工程：单细胞纯培养工业化过程，以产生大量目的物。1．液体培养——深层发酵2．固体培养——浅盘培养发酵设备：空压机、种子罐、发酵罐，蒸汽发生器、空气过滤器、离心机及多种参数控制与检测设备，以L-Lys生产设备为例，见图1所示。图1L-Lys生产过程工艺设备图第二节生物药物提取、分布、纯化技术基础二、生物活性物质的提取，浓缩与干燥1．提取方法与优化（1）溶剂选择（2）添加剂①保护剂；②酶抑制剂（3）提取条件①温度；②pH；③盐；④表面活性剂HLB值可供选择表面活性剂2．浓缩与干燥（1）浓缩方法：①盐析；②有机溶剂沉淀；③超滤；④真空浓缩或薄膜浓缩；⑤离心冻干（2）干燥：①低温真空干燥；②喷雾干燥；③冷冻干燥第三节生物技术药物制造技术基础Basisofbiotechdrugpharmaceuticaltechnolog2．基因工程药物制造过程二、基因工程制药主要操作技术图5目的基因的获得cDNA与载体连接方法同聚尾连接法用3’-脱氧核苷末端转移酶，使cDNA与载体DNA3’末端带上互补同型多聚体序列：如质粒-poly-C（或A）cDNA-poly-G(或T)两者退火后，经T4DNA连接酶封口，构建重组体。表达产物流程*inclusionbodies由表达产物重组蛋白,宿主蛋白和膜蛋白组成，以表达产物为主，其一级结构正确，但空间结构错误，没有活性，不溶于水，可低速离心收集包涵体，用变性剂SDS尿素，盐酸胍溶解，再稀释透析除去变性剂，使其复性。第四节生物制药工艺中试放大设计一、中试放大目的与规模1．目的：（1）建立稳定工艺、大批量制备足量合格产品，供应临床前与临床研究；（2）研究工艺参数制定工艺规程和检定规程，为正式生产提供工艺参数，保证能在以后生产中应用。二、规模：中试是由小试转入工业化生产的过渡性研究，是取得成功产业化的关键。2．蛋白质工程研究基本程序其工作流程如下：