蛋白质相互作用研究技术酵母双杂交谷胱苷肽-S-转移酶沉淀试验(GST-pulldown）免疫共沉淀双分子荧光互补技术(BIFC)生物发光共振能量转移（ＢＲＥＴ）技术一、细菌双杂交系统酵母激活因子GAL4：N端：147个氨基酸组成的DNA结合域(BD)，C端：113个氨基酸组成的转录激活域(AD)。GAL4分子的DNA结合域可以和上游激活序列(upstreamactivatingsequence，UAS)结合，而转录激活域则能激活UAS下游的基因进行转录。组成部分：（1）与BD融合的蛋白表达载体，被表达的蛋白称诱饵蛋白（bait）；（2）与AD融合的蛋白表达载体，被其表达的蛋白称靶蛋白（prey）；（3）带由一个或多个报告基因的宿主菌株。.BD酵母双杂交基本过程二、谷胱苷肽-S-转移酶沉淀试验(GST-pulldown）原理GSTpulldown实验流程三、免疫共沉淀原理免疫共沉淀实验流程四、双分子荧光互补技术(bimolecularfluorescencecomplementation,BIFC).BIFC的优势五、生物发光共振能量转移（ＢＲＥＴ）技术蛋白质之间相互作用以及通过相互作用而形成的蛋白复合物是细胞各种基本功能的主要完成者。几乎所有的重要生命活动，包括DNA的复制与转录、蛋白质的合成与分泌、信号转导和代谢等等，都离不开蛋白质之间的相互作用。谢谢观看